非洲豬瘟（ASF）是生豬養(yǎng)殖業(yè)的頭號威脅，其強傳染性與高死亡率可造成巨大經(jīng)濟損失?？焖佟蚀_的早期檢測是防控疫情的關(guān)鍵。
非洲豬瘟快檢儀作為核心工具，已廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖場、屠宰場及檢驗檢疫環(huán)節(jié)。掌握其規(guī)范操作方法，不僅能提升檢測效率，更能為疫情預(yù)警和精準處置提供可靠依據(jù)。
一、檢測前的周密準備
1.樣本采集與處理
樣本質(zhì)量直接決定檢測結(jié)果的可靠性。常見樣本類型包括：
?、傺簶颖荆翰杉i只靜脈血后，靜置析出血清或使用抗凝血漿。需離心去除雜質(zhì)，收集上清液。
②組織樣本：取少量組織勻漿后，用PBS緩沖液稀釋，離心取上清。
?、劭诒?環(huán)境拭子：將棉簽深入豬只鼻腔或口腔旋轉(zhuǎn)取樣，浸入緩沖液混合后使用。
所有樣本需避免反復(fù)凍融，若含防腐劑NaN3需注意其可能影響酶反應(yīng)。
2.儀器與試劑準備
?、賰x器校準：開機前確保設(shè)備放置于水平臺面，通風(fēng)口無遮擋，環(huán)境溫度保持在15–35℃。部分儀器需預(yù)熱以避免溫差干擾。
?、谠噭┡渲疲焊鶕?jù)檢測需求選擇配套試劑盒。試劑需平衡至室溫，濃縮洗滌液按比例稀釋。
實驗需備齊微量加樣器、離心管、封板膜等耗材，避免交叉污染。
二、規(guī)范操作流程與關(guān)鍵步驟
不同原理的快檢儀操作側(cè)重不同，但均需嚴格遵循流程：
1.熒光PCR快檢儀
?、偌訕优c程序設(shè)置：將處理好的樣本與反應(yīng)液加入PCR管，放置于儀器樣品艙。在觸摸屏上選擇預(yù)設(shè)程序，設(shè)置溫度與時間參數(shù)。
?、谶\行與監(jiān)控：啟動后，儀器自動進行核酸擴增及熒光信號采集。操作員需實時觀察擴增曲線，確保反應(yīng)正常。
?、劢Y(jié)果判讀：檢測完成后，軟件自動生成Ct值。Ct值越低，表明病毒載量越高。結(jié)果需與陰/陽性對照對比驗證。
2.ELISA免疫檢測儀（快速篩查）
?、侔鍡l加樣：從試劑盒中取出預(yù)包被板條，依次加入陰性對照、陽性對照和待測樣本，并加入酶標記物。
?、跍赜c洗滌：37℃避光溫育60分鐘后，用洗滌液清洗板孔5次，去除未結(jié)合物質(zhì)。
?、埏@色與測定：加入底物液避光反應(yīng)15分鐘，再加入終止液。15分鐘內(nèi)將板條放入儀器，在450nm波長下讀取OD值，分析樣本陰陽性。
三、注意事項與維護要點
1.避免污染：實驗區(qū)域應(yīng)分區(qū)，操作中勤換手套，耗材一次性使用。
2.質(zhì)量控制：每批次檢測均需設(shè)置陰/陽性對照，確保試劑有效性及操作準確性。
3.儀器維護：定期清潔樣品艙，檢查光學(xué)系統(tǒng)與加熱模塊。長期不用時斷電存放于干燥環(huán)境。
4.數(shù)據(jù)管理：結(jié)果導(dǎo)出保存?zhèn)浞荩阌谒菰磁c分析。部分儀器支持USB導(dǎo)出或直接打印報告。
結(jié)語
非洲豬瘟快檢儀是疫情防線上的“偵察兵”，其規(guī)范使用貫穿于樣本處理、精確操作及系統(tǒng)維護的全過程。無論是實驗室的熒光PCR儀，還是現(xiàn)場便捷的ELISA檢測儀，只有嚴格遵循流程，才能確保結(jié)果可靠，真正實現(xiàn)早發(fā)現(xiàn)、早處置，為生豬產(chǎn)業(yè)筑牢安全屏障。
